К сожалению, ни один человек не застрахован от поражения организма патогенными микроорганизмами. Их существует великое множество. В частности, среди огромного количества грамположительных бактерий наиболее распространенными возбудителями инфекционных заболеваний являются стрептококки группы А. В отличие от других разновидностей стрептококков, строение клеточных стенок этих бактерий имеет свои структурные особенности. Они представляют собой микроорганизмы округлой формы, которые размножаются попарно или образуют колонии, напоминающие вытянутую цепочку.

Заболевания и пути передачи

Стрептококки, относящиеся к группе А, вызывают очень тяжелые инфекционные болезни: пневмонию, фарингит, скарлатину, эндокардит, гломерулонефрит, ревматизм, послеродовой сепсис, перинатальные инфекции и многие другие. Данная бактерия попадает на слизистые оболочки, кожу, в кишечник человека, размножается, после чего проникает в кровь, поражая различные органы. Стрептококк может передаваться от больного человека по-разному – воздушно-капельным, половым, алиментарным (через продукты питания) или контактным (через грязные руки) путем. Причем чаще всего причиной заражения является несоблюдение элементарных правил гигиены.

Бета-гемолитический стрептококк

Среди других разновидностей этих бактерий, принадлежащих к группе А, самым опасным для организма человека считается бета-гемолитический стрептококк. Большинство людей, болеющих ангиной, фарингитом, отитом, «подхватили» именно эту стрептококковую инфекцию. Бета-гемолитический стрептококк отличается особенностью строения, воздействием на иммунитет, функциональной активностью. Если посмотреть на этот микроб в микроскоп, то можно увидеть сцепленные между собой шарики, напоминающие бусинки, нанизанные на нитку. Вообще, стрептококки классифицируются по их способности разрушать красные кровяные тельца – эритроциты. Так, альфа-гемолитическая бактерия разрушает клетки крови только частично, гамма-гемолитическая инфекция никак не нарушает структуру эритроцитов, а бета-гемолитический стрептококк, относящийся к группе А, вызывает полное разрушение (гемолиз) красных кровяных телец.

Что касается букв латинского алфавита, обозначающего ту или иную группу бета-гемолитического стрептококка, то они определяют тип строения клеточных мембран этих бактерий. Стрептококки, представляющие семейство группы А, характеризуются определенным составом среды, рН, антигенными свойствами, способностью размножения при различных температурных режимах. Некоторые специалисты предпочитают использовать другое латинское название бета-гемолитического стрептококка данной группы – Streptococcus pyogenes (пиогенный). По своей сути оба термина являются синонимами.

Кроме вышеперечисленных заболеваний, этот патогенный микроорганизм может стать причиной возникновения целого ряда других инфекционно-воспалительных патологий. К ним относятся стрептодермия, миозит (воспаление скелетных мышц), фасцит (боль в пятках), менингит, шейная (подчелюстная) флегмона, паратонзиллярный абсцесс (гнойное воспаление миндалин). Чтобы выявить наличие стрептококковой инфекции группы А, проводят бактериологическое исследование крови, берут соскоб с кожного покрова, мазок из горла.

Лечение стрептококковой инфекции группы А

В случае обнаружения в организме больного человека данного инфекционного возбудителя, назначается антибактериальная терапия. С этой целью применяют антибиотики из лекарственных групп пенициллинов, оксациллинов, цефалоспоринов, а также эритромицин. Штаммы бета-гемолитической стрептококковой инфекции группы А постоянно видоизменяются, становятся устойчивыми к некоторым медикаментам, поэтому важно правильно подобрать лекарство. Лучше других справляются с этой бактерией антибиотики пенициллиновой группы (например, Бензилпенициллин или Ампициллин), но они у многих людей вызывают аллергические реакции. В таких случаях врачи обычно останавливают свой выбор на препаратах эритромицинового ряда. К слову, если причиной заболевания стал бета-гемолитической стрептококк другой группы (серотипа), то не всегда требуется лечение антибактериальными средствами. Довольно часто иммунные силы организма способны самостоятельно справиться с инфекцией. В любом случае после перенесенного заболевания, вызванного стрептококком группы А, в организме человека вырабатывается так называемый типоспецифический иммунитет против штаммов именно этого инфекционного возбудителя.

К роду Streptococcus относятся: Streptococcus pyogenes (гемолитический) и Streptococcus pneumoniae (пневмококк). Впервые стрептококки были обнаружены Бильротом (1874), Л. Пастером (1879). Изучены они были Э. Розенбахом (1884).

Streptococcus pyogenes (гемолитический)

Морфология . Стрептококки - это кокки, имеющие шаровидную форму. Диаметр каждого кокка в среднем 0,6-1 мкм, однако для них характерен полиморфизм: встречаются мелкие и крупные кокки, строго шаровидные и овальные. Стрептококки располагаются цепочкой, что является результатом деления их в одной плоскости. Длина цепочек разная. На плотной питательной среде цепочки обычно короткие, на жидких - длинные. Стрептококки неподвижны, не имеют спор (см. рис. 4) Свежевыделенные культуры иногда образуют капсулу. На ультратонких срезах видна микрокапсула, под ней расположена трехслойная клеточная стенка и трехслойная цитоплазматическая мембрана. Грамположительны.

Культивирование . Стрептококки - факультативные анаэробы. Растут при температуре 37° С и рН среды 7,6-7,8. Оптимальными средами для их выращивания являются среды, содержащие кровь или сыворотку крови. На плотных питательных средах колонии стрептококков мелкие, плоские, мутные, сероватого цвета. На агаре с кровью некоторые разновидности стрептококков образуют гемолиз. β-Гемолитические стрептококки образуют четкую зону гемолиза, α-гемолитические стрептококки образуют небольшую зеленоватую зону (результат перехода гемоглобина в метгемоглобин). Встречаются стрептококки, не дающие гемолиза.

На сахарном бульоне стрептококки растут с образованием пристеночного и придонного мелкозернистого осадка, бульон при этом остается прозрачным.

Ферментативные свойства . Стрептококки обладают сахаролитическими свойствами. Они расщепляют глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит (не всегда) и мальтозу с образованием кислоты. Протеолитические свойства у них слабо выражены. Они свертывают молоко, желатин не разжижают.

Токсинообразование . Стрептококки образуют ряд экзотоксинов: 1) стрептолизины - разрушают эритроциты (О-стрептолизин обладает кардиотоксическим действием); 2) лейкоцидин - разрушает лейкоциты (образуется высоковирулентными штаммами); 3) эритрогенный (скарлатинозный) токсин - обусловливает клиническую картину скарлатины - интоксикацию, сосудистые реакции, сыпь и пр. Синтез эритрогенного токсина детерминирован профагом; 4) цитотоксины - обладают способностью вызывать гломерулонефрит.

У стрептококков обнаружены различные антигены. В цитоплазме клетки содержится видовой нуклеопротеидной природы антиген - единый для всех стрептококков. На поверхности клеточной стенки расположены протеиновые типовые антигены. В клеточной стенке стрептококков обнаружен полисахаридный групповой антиген.

По составу полисахаридной группоспецифической фракции антигена все стрептококки делятся на группы, обозначаемые большими латинскими буквами А, В, С, D и т. д. до S. Кроме групп, стрептококки разделены на серологические типы, которые обозначаются арабскими цифрами.

Группа А включает 70 типов. В эту группу входит большинство стрептококков, вызывающих различные заболевания у человека. Группа В включает в основном условно-патогенные для человека стрептококки. Группа С включает патогенные для человека и животных стрептококки. Группа D состоит из непатогенных для человека стрептококков, однако в эту группу входят энтерококки, которые являются обитателями кишечного тракта человека и животных. Попадая в другие органы, они обусловливают воспалительные процессы: холециститы, пиелиты и др. Таким образом, их можно отнести к условно-патогенным микробам.

Принадлежность выделенных культур к одной из серологических групп определяют с помощью реакции преципитации с групповыми сыворотками. Для определения серологических типов используют реакцию агглютинации с типоспецифическими сыворотками.

Стрептококки довольно устойчивы в окружающей среде. При температуре 60° С погибают через 30 мин.

В высушенном гное и мокроте они сохраняются месяцами. Обычные концентрации дезинфицирующих веществ губят их через 15-20 мин. Энтерококки значительно устойчивее, дезинфицирующие растворы убивают их только через 50-60 мин.

Восприимчивость животных . К патогенным стрептококкам чувствителен рогатый скот, лошади, собаки, птицы. Из лабораторных животных чувствительны кролики и белые мыши. Однако стрептококки, патогенные для человека, не всегда патогенны для экспериментальных животных.

Источники инфекции . Люди (больные и носители), реже животные или инфицированные продукты.

Пути передачи . Воздушно-капельный и воздушно-пылевой, иногда пищевой, возможен контактно-бытовой.

Заболевания могут возникать в результате экзогенного заражения, а также эндогенно - при активации условно-патогенных стрептококков, обитающих на слизистых оболочках зева, носоглотки, влагалища. Снижение сопротивляемости организма (охлаждение, голодание, переутомление и пр.) может привести к возникновению аутоинфекций.

Большое значение в патогенезе стрептококковых инфекций имеет предварительная сенсибилизация - как следствие ранее перенесенного заболевания стрептококковой этиологии.

При проникновении в кровяное русло стрептококки обусловливают тяжело протекающий септический процесс.

Заболевания у человека чаще вызывают β-гемолитические стрептококки серологической группы А. Они продуцируют ферменты патогенности: гиалуронидазу, фибринолизин (стрептокиназу), дезоксирибонуклеазу и др. Кроме того, у стрептококков обнаруживают капсулу, М-протеин, обладающие антифагоцитарными свойствами.

Стрептококки вызывают у человека различные острые и хронически протекающие инфекции, как с образованием гноя, так и не нагноительные, различающиеся по клинической картине и патогенезу. Нагноительные - флегмоны, абсцессы, раневые инфекции, ненагноительные - острые инфекции верхних дыхательных путей, рожистое воспаление, скарлатина, ревматизм и др.

Стрептококки часто вызывают вторичные инфекции при гриппе, кори, коклюше и других заболеваниях и нередко осложняют раневые инфекции.

Иммунитет . По характеру иммунитет - антитоксический и антибактериальный. Постинфекционный антимикробный иммунитет малонапряженный. Это объясняется слабой иммуногенностью стрептококков и большим количеством сероваров, не дающих перекрестного иммунитета. Кроме этого, при стрептококковых заболеваниях наблюдается аллергизация организма, чем объясняют склонность к рецидивам.

Профилактика . Сводится к санитарно-гигиеническим мероприятиям, укреплению общей резистентности организма. Специфическая профилактика не разработана.

Лечение . Применяют антибиотики. Чаще используют пенициллин, к которому стрептококки не приобрели устойчивости, а также эритромицин и тетрациклин.

Значение стрептококка в этиологии ревмокардита . Патогенез ревмокардитов изучен недостаточно. Но в пользу роли стрептококка в развитии этого заболевания говорит ряд фактов:

1. У больных ревмокардитом из зева высевают В-гемолитический стрептококк.

2. Ревматизм часто возникает после перенесенной ангины, тонзиллитов, фарингитов, сенсибилизирующих организм.

3. В сыворотке крови больных обнаруживают антистрептолизин, антистрептогиалуронидазу - антитела к стрептококковым ферментам, токсинам.

4. Косвенным подтверждением роли стрептококка является успешное лечение пенициллином.

В последнее время в возникновении хронических форм ревмокардита придают значение L-формам стрептококка.

Профилактика обострений ревмокардита сводится к предупреждению стрептококковых заболеваний (например, весной и осенью проводят профилактический курс введения пенициллина). Лечение сводится к применению антибактериальных препаратов - пенициллина.

Значение стрептококка в этиологии скарлатины . Г. Н. Габричевский (1902) впервые высказал предположение о том, что гемолитический стрептококк является возбудителем скарлатины. Но так как стрептококки, выделяемые при других заболеваниях, не отличались от возбудителей скарлатины, то это мнение не всеми разделялось. В настоящее время установлено, что скарлатину вызывают стрептококки группы А, вырабатывающие эритрогенный токсин.

У переболевших возникает иммунитет - стойкий, антитоксический. Его напряженность определяют постановкой реакции Дика - внутрикожным введением эритрогенного токсина. У не болевших вокруг места введения возникают гиперемия и отек, что характеризуется как положительная реакция (отсутствие антитоксина в сыворотке крови). У переболевших такая реакция отсутствует, так как образовавшийся у них антитоксин нейтрализует эритрогенный токсин.

Профилактика . Изоляция, госпитализация. Контактным, ослабленным детям вводят гамма-глобулин. Специфическая профилактика не разработана.

Лечение . Используют пенициллин, тетрациклин. В тяжелых случаях вводят антитоксическую сыворотку.

Цель исследования: выявление стрептококка и определение его серовара.

Материал для исследования

1. Слизь из зева (ангина, скарлатина).

2. Соскоб с пораженного участка кожи (рожа, стрептодермия).

3. Гной (абсцесс).

4. Моча (нефрит).

5. Кровь (подозрение на сепсис; эндокардит).

Основные методы исследования

1. Бактериологический.

2. Микроскопический.

Ход исследования

Второй день исследования

Вынимают чашки из термостата и просматривают. При наличии подозрительных колоний из части их делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. При обнаружении в мазке стрептококков часть оставшейся колонии пересевают в пробирки на агар с сывороткой для выделения чистой культуры и на бульон с кровью в пробирках. К концу дня 5-6-часовую культуру из бульона или агара пересевают на бульон Мартена с 0,25% глюкозы для определения серологической группы в реакции преципитации по Ленсфильд. Пробирки и флаконы помещают в термостат и оставляют до следующего дня.

Третий день исследования

Вынимают посевы из термостата, проверяют чистоту культуры на скошенном агаре, делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии чистой культуры стрептококка производят посев на среды Гисса (лактозу, глюкозу, мальтозу, сахарозу и маннит), молоко, желатин, 40% желчь и ставят в термостат.

Просматривают бульон Мартена. При наличии специфического роста ставят реакцию преципитации по Ленсфильд для определения серологической группы.

Постановка реакции преципитации по Ленсфильд . Суточную культуру, выросшую на бульоне Мартена, разливают в несколько центрифужных пробирок, центрифугируют в течение 10-15 мин (3000 об/мин).

Надосадочную жидкость сливают в банку с дезинфицирующим раствором, а осадок заливают стерильным изотоническим раствором натрия хлорида и вновь центрифугируют. К осадку, собранному из всех центрифужных пробирок, прибавляют 0,4 мл 0,2% хлороводородной кислоты. Затем пробирку помещают в водяную баню и кипятят 15 мин, периодически встряхивая. После кипячения полученную взвесь вновь центрифугируют. Антиген при этом экстрагируется в надосадочную жидкость, которую сливают в чистую пробирку и нейтрализуют 0,2% раствором гидроксида натрия до рН 7,0-7,2. В качестве индикатора прибавляют бромтимоловый голубой (0,01 мл 0,04% раствора). При указанной реакции цвет меняется от соломенно-желтого до голубого.

Затем в 5 преципитационных пробирок разливают по 0,5 мл антистрептококковых групповых сывороток, которые готовят иммунизацией кроликов (см. главу 19). В 1-ю пробирку вносят сыворотку А, во 2-ю - сыворотку В, в 3-ю - сыворотку С, в 4-ю - сыворотку D, в 5-ю - изотонический раствор натрия хлорида (контроль). После этого пастеровской пипеткой во все пробирки по стенке осторожно наслаивают полученный экстракт (антиген).

При положительной реакции в пробирке с гомологичной сывороткой на границе экстракта с сывороткой образуется тонкое молочно-белое кольцо (рис. 38).

Четвертый день исследования

Производят учет результатов (табл. 25).

В настоящее время определяют дезоксирибонуклеазу, а также антистрептогиалуронидазу, антистрептолизин-О.

Контрольные вопросы

1. Какие основные методы лабораторного исследования для выявления стрептококков Вы знаете?

2. Для чего ставят реакцию преципитации по Ленсфильд?

3. Почему антиген при постановке этой реакции должен быть прозрачным? Опишите технику постановки этой реакции.

Получите у преподавателя антистрептококковыс сыворотки А, В, С, D и изотонический раствор натрия хлорида. Поставьте реакцию преципитации, результаты покажите преподавателю и зарисуйте.

Питательные среды

Агар с кровью (см. главу 7).

Агар с сывороткой (см. главу 7).

Среды Гисса (сухие).

Мясопептонный желатин (МПЖ) . К 100 мл МПБ прибавляют 10-15 г мелко нарезанного желатина. Желатин должен набухать при медленном нагревании в водяной бане (при температуре 40-50° С). К расплавленному желатину прибавляют 10% раствор натрия карбоната (питьевая сода) и устанавливают рН 7,0. Затем сразу фильтруют через складчатый фильтр. Фильтрование идет медленно. Для ускорения процесса фильтрацию можно производить в горячем автоклаве. Профильтрованную среду разливают в пробирки по 6-8 мл и стерилизуют. Стерилизацию производят либо дробно при температуре 100° С 3 дня подряд, либо одномоментно при 110° С 20 мин в автоклаве. Охлаждение среды производят в пробирках, поставленных вертикально.

Приготовление молока . Свежее молоко доводят до кипения, ставят в прохладное место на сутки, освобождают от сливок, вновь кипятят. Оставляют на сутки и снимают верхний слой. Обезжиренное молоко фильтруют через слой ваты, затем подщелачивают 10% раствором натрия карбоната до рН 7,2 и разливают в пробирки по 5-6 мл.

Бульон Мартена . К мясной воде прибавляют равное количество пептона Мартена (фарш из свиных желудков, подвергшихся воздействию хлороводородной кислоты). Полученную смесь кипятят 10 мин, подщелачивают 10% раствором гидроксида натрия до рН 8,0, добавляют 0,5 натрия ацетата, вновь кипятят и разливают в стерильную посуду. К бульону Мартена прибавляют 0,25% глюкозы.

Среда Китта - Тароцци (см. главу 34).

Streptococcus pneumoniae (пневмококк)

Пневмококки впервые описаны Р. Кохом (1871).

Морфология . Пневмококки - это диплококки, у которых стороны клеток, обращенные друг к другу, уплощены, а противоположные стороны вытянуты, поэтому они имеют ланцетовидную форму, напоминающую пламя свечи (см. рис. 4). Размер пневмококков 0,75-0,5 × 0,5-1 мкм, располагаются они парами. В жидких питательных средах часто образуют короткие цепочки, приобретая сходство со стрептококками. Превмококки неподвижны, не имеют спор, в организме образуют капсулу, окружающую оба кокка. В капсуле содержится термоустойчивое вещество антифагин (защищающий пневмококк от фагоцитоза и действия антител). При росте на искусственных питательных средах пневмококки утрачивают капсулу. Пневмококки грамположительны. В старых культурах встречаются грамотрицательные бактерии.

Культивирование . Пневмококки - факультативные анаэробы. Растут при температуре 36-37° С и рН среды 7,2-7,4. Они требовательны к средам, так как не могут синтезировать многие аминокислоты, поэтому растут только на средах с добавлением нативного белка (крови или сыворотки). На агаре с сывороткой образуют мелкие, нежные, довольно прозрачные колонии. На агаре с кровью вырастают влажные колонии зеленовато-серого цвета, окруженные зеленой зоной, что является результатом перехода гемоглобина в метгемоглобин. Пневмококки хорошо растут в бульоне с добавлением 0,2% глюкозы и в бульоне с сывороткой. Рост в жидких средах характеризуется диффузным помутнением и пылевидным осадком на дне.

Ферментативные свойства . Пневмококки обладают довольно выраженной сахаролитической активностью. Они расщепляют: лактозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, инулин с образованием кислоты. Не ферментируют маннит. Протеолитические свойства у них выражены слабо: молоко они свертывают, желатин не разжижают, индол не образуют. Пневмококки растворяются в желчи. Расщепление инулина и растворение в желчи является важным диагностическим признаком, отличающим Streptococcus pneumoniae от Streptococcus pyogenes.

Факторы патогенности . Пневмококки продуцируют гиалуронидазу, фибринолизин и др.

Токсинообразование . Пневмококки образуют эндотоксин, гемолизин, лейкоцидин. Вирулентность пневмококков связана также с наличием в капсуле антифагина.

Антигенная структура и классификация . В цитоплазме пневмококков имеется общий для всей группы протеиновый антиген, а в капсуле - полисахаридный антиген. По полисахаридному антигену все пневмококки разделяют на 84 серовара. Среди патогенных для человека наиболее часто встречаются I, II, III серовары.

Устойчивость к факторам окружающей среды . Пневмококки относятся к группе нестойких микроорганизмов. Температура 60° С губит их через 3-5 мин. К низким температурам и высушиванию они довольно устойчивы. В высушенной мокроте сохраняют жизнеспособность до 2 мес. На питательной среде они сохраняются не более 5-6 дней. Поэтому при культивировании необходимо делать пересевы через каждые 2-3 дня. Обычные растворы дезинфицирующих веществ: 3% фенол, сулема в разведении 1:1000 губят их через несколько минут.

Особенно чувствительны пневмококки к оптохину, который убивает их в разведении 1:100000.

Восприимчивость животных . Естественным хозяином пневмококков является человек. Однако пневмококки могут вызвать заболевания у телят, ягнят, поросят, собак и обезьян. Из экспериментальных животных к пневмококку высокочувствительны белые мыши.

Источники инфекции . Больной человек и бактерионоситель.

Пути передачи . Воздушно-капельный путь, может быть воздушно-пылевой.

Входные ворота . Слизистая оболочка верхних дыхательных путей, глаз и уха.

Заболевания у человека . Пневмококки могут вызвать гнойно-воспалительные заболевания разной локализации. Специфическими для пневмококков являются:

1) крупозная пневмония;

2) ползучая язва роговицы;

Наиболее частым заболеванием является крупозная пневмония, захватывающая одну, реже две или три доли легкого. Заболевание протекает остро, сопровождается высокой температурой, кашлем. Заканчивается обычно критически.

Иммунитет . После перенесенного заболевания остается нестойкий иммунитет, так как пневмония характеризуется рецидивами.

Профилактика . Сводится к санитарно-профилактическим мероприятиям. Специфическая профилактика не разработана.

Лечение . Используют антибиотики - пенициллин, тетрациклин и др.

Контрольные вопросы

1. Морфология пневмококков. Культивирование и ферментативные свойства.

2. Какие факторы обусловливают патогенность пневмококков и что защищает пневмококки от фагоцитоза?

3. Что является основными воротами пневмококковой инфекции. Какие заболевания вызывают пневмококки?

Микробиологическое исследование

Цель исследования: выявление пневмококка.

Материал для исследования

1. Мокрота (пневмония).

2. Слизь из зева (ангина).

3. Отделяемое из язвы (ползучая язва роговицы).

4. Выделение из уха (отит).

5. Гной (абсцесс).

6. Плевральный пунктат (плеврит).

7. Кровь (подозрение на сепсис).

1 (Лучше брать утреннюю мокроту (при специфической пневмонии мокрота имеет ржавый цвет). )

Основные методы исследования

1. Микроскопический.

2. Микробиологический.

3. Биологический.

Ход исследования

Биологическая проба . Немного (3-5 мл мокроты) эмульгируют в стерильном бульоне, 0,5 мл этой смеси вводят внутрибрюшинно белой мыши. Через 6-8 ч у мыши отмечаются признаки заболевания. В это время пневмококк уже можно обнаружить в экссудате брюшной полости. Экссудат берут стерильным шприцем. Из него делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для выделения чистой культуры экссудат засевают на агар с сывороткой. Если мышь погибает или заболевает, делают посев крови из сердца на агар с сывороткой крови для выделения чистой культуры. Посевы ставят в термостат.

Ускоренный метод определения типа пневмококка (реакция микроагглютинации). 4 капли экссудата из брюшной полости зараженной мыши наносят на предметное стекло. К первой капле прибавляют агглютинирующую сыворотку I типа, ко второй - сыворотку II типа, к третьей - III типа, к четвертой - изотонический раствор натрия хлорида (контроль).

Сыворотки I и II типа предварительно разводят в соотношении 1:10, а сыворотку III типа - 1:5. Все капли размешивают, высушивают, фиксируют и окрашивают разведенным фуксином. При положительном результате в одной из капель отмечается скучивание микробов (агглютинация).

Второй день исследования

Посевы вынимают из термостата, просматривают и из подозрительных колоний делают мазки. При наличии в мазках грамположительных ланцетовидных диплококков 2-3 колонии выделяют на скошенный агар с сывороткой для получения чистой культуры. Посевы помещают в термостат. Из бульона делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют.

Третий день исследования

Посевы вынимают из термостата. Проверяют чистоту культуры - делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии в выделенной культуре грамположительных ланцетовидных диплококков проводят идентификацию выделенной культуры путем посева:

1) на среды Гисса (лактоза, глюкоза, сахароза, мальтоза) проводят посев обычным способом - уколом в среду;

2) на среду с инулином;

3) на среду с оптохином;

4) ставят пробу с желчью.

Проба на инулин . Исследуемую культуру засевают на питательную среду, содержащую инулин и лакмусовую настойку, и ставят в термостат. Через 18-24 ч посевы вынимают из термостата. При наличии пневмококков среда окрашивается в красный цвет (стрептококки консистенцию и цвет среды не меняют).

Определение чувствительности к оптохину . Выделенную культуру засевают на 10% агар с кровью, содержащий оптохин 1:50000. Пневмококки, в отличие от стрептококков, не растут на средах, содержащих оптохин.

Проба с желчью . В агглютинационные пробирки наливают по 1 мл исследуемой бульонной культуры. В одну из них добавляют каплю кроличьей желчи, вторая пробирка служит контролем. Обе пробирки помещают в термостат. Через 18-24 ч наступает лизис пневмококков, который выражается в просветлении мутного бульона. В контроле взвесь остается мутной.

Пробу с желчью можно поставить на плотной питательной среде. Для этого на колонию пневмококков, выросших в чашках с агаром и сывороткой, наносят крупинку сухой желчи - колония растворяется - исчезает.

Четвертый день исследования

Производят учет результатов (табл. 26).

Примечание. к - расщепление углеводов с образованием кислоты.

В настоящее время широко используются серологические методы исследования (РСК и РИГА) для определения стрептококковых антител. Определение группы и серовара выделенной культуры производят с помощью флюоресцирующих антител.

Определение вирулентности пневмококка . Суточную бульонную культуру пневмококка разводят 1% пептонной водой от 10 -2 до 10 -8 , 0,5 мл каждого разведения вводят двум белым мышам. Культуру, вызвавшую гибель мышей в разведении 10 -7 , оценивают как вирулентную, в разведении 10 -4 -10 -6 считают средневирулентной. Культура, не вызвавшая гибель мышей, авирулентна.

Контрольные вопросы

1. Какие методы выделения чистой культуры пневмококков Вы знаете?

2. Какое животное наиболее чувствительно к пневмококку?

3. Какие реакции ставят с экссудатом зараженной мыши и с какой целью?

4. От каких представителей гноеродных кокков следует дифференцировать пневмококк и с помощью какой пробы?

5. Как определить вирулентность пневмококков?

Задание

Составьте схему исследования мокроты, указав его этапы по дням.

Питательные среды

Агар с сывороткой (см. главу 7).

Бульон с сывороткой (см. главу 7).

Агар с кровью (см. главу 7).

Среды Гисса (сухие).

Среда для пробы с инулином . К 200 мл дистиллированной воды прибавляют 10 мл инактивированной бычьей сыворотки, 18 мл лакмусовой настойки и 3 г инулина. Стерилизуют текучим паром при 100° С 3 дня подряд. Желчный бульон (см. главу 7).

Стрептококк - патогенный микроб, который можно обнаружить в микрофлоре у любого человека. Бактерии располагаются на слизистых оболочках в носу и глотке, спускаются ниже по дыхательным путям, достигают толстого кишечника и мочеполовых органов.

Возникают эти инфекции при переохлаждении или когда в организм они попадают в большом количестве и при ослабленном иммунитете. Не все виды стрептококков наносят организму вред, некоторые из них приносят пользу.

Что такое стрептококк?

Стрептококки выглядят как правильный или чуть-чуть вытянутый шарик, не имеют жгутиков и не образуют спор. Не передвигаются и живут в условиях, где полностью отсутствует кислород. Рассматривая их под микроскопом, можно увидеть, что они всегда держатся вместе или выстроены в ряд цепочкой. В природе они находятся в почве, на растениях, теле животных и человека. Стрептококки устойчивы к замораживанию и нагреванию , способность к размножению у них сохраняется годами.

Для развития стрептококковой колонии необходима питательная среда: сладкий раствор, кровь или сыворотка. Такие условия создают в специальных лабораториях для наблюдения за ними. Когда колония стрептококков занимает поверхность, она образует зеленоватую полупрозрачную плёнку.

Причины стрептококковых инфекций

Является бета гемолитический стрептококк , он разрушает красные кровяные тельца - эритроциты. Стрептококки, живя в организме человека, начинают выделять токсины и яд, которые действуют на организм человека губительно. Человек начинает болеть и у него появляются слабость, боль, жар и тошнота.

Факторы патогенности

1. Стрептолизин - яд, который наносит вред клеткам сердца и крови.
2. Скарлатинозный эритрогенин - токсин, расширяющий капилляры. При скарлатине вызывает кожную сыпь.
3. Лейкоцидин - фермент, разрушающий иммунные клетки крови (лейкоциты), снижает иммунную систему и она не может противостоять инфекциям.
4. Нейротоксин и летальный токсин - яды, которые вызывают омертвение тканей.
5. Амилаза, гиалуронидаза, протеиназа и стрептокиназа - ферменты, за счёт которых стрептококки поглощают здоровую ткань и заполняют человеческий организм.

Там, где располагаются стрептококки, появляется очаг воспаления, у человека возникает отёк и появляется боль. Бактерии выделяют токсины и яд, которые расходятся с кровью по организму. Поэтому при стрептококковых инфекциях человеку всегда сопутствует общее недомогание, в тяжёлых случаях бывает масштабная интоксикация. Может возникнуть рвота, обезвоживание и помутнение сознания. Рядом с очагами воспаления набухают лимфоузлы.

Иммунитет воспринимает их как мощный аллерген и начинает вырабатывать антитела. Опасным последствием могут стать аутоиммунные заболевания, осложнения: ревматоидный артрит, миокардит, перикардит, эндокардит.

Выступает на кожных покровах и проявляется на коже шеи, лице и руках, поражает дыхательные органы.

Причины возникновения

Самые распространённые виды стрептококка - альфа (зеленящие), бета, гамма (негемолитические). Для здоровья опасны бета-стрептококки , а зеленящие и негемолитические не разрушают эритроциты, хоть и питаются за счёт человека, от них не заболеешь серьёзным заболеванием.

Бактерии группы А способствуют возникновению ангины, бронхита, фарингита, пневмонии, пародонтита, ревматизма. Группа В больше поражает мочеполовую систему, так как эти бактерии поселяются в уретре у мужчин и во влагалище у женщин.

Есть полезные бактерии - молочнокислый стрептококк . Он востребован на молокозаводах, из него изготавливают молочные и кисломолочные продукты: ряженка, кефир, сметана, простокваша и т. д. Помогает при лактазной недостаточности, когда в организме человека возникает дефицит фермента, он отвечает за усвоение лактозы (молочный сахар). Грудничкам термофильный стрептококк дают при обильных срыгиваниях.

Передаётся стрептококковая инфекция:

1. Воздушно-капельным путём со слюной (при чихании, кашле, крике).
2. Контактно-бытовым (при контакте с больным или от предметов, он пользовался).
3. Половым (при незащищённом половом акте).

Стрептококк группы А

Гемолитический стрептококк - грамположительная бактерия, принадлежит семейству лактобацилл. На вид они округлой формы, размножаются парами или образуют колонии. В норме они находятся в организме каждого человека, но начинают активизироваться при ослабленном иммунитете или переохлаждении. Располагаются гемолитические стрептококки на слизистых носа и горла, в дыхательных путях и мочеполовых органах, толстом кишечнике, потом попадают в кровь и начинают поражать различные органы.

Стрептококки группы А вызывают тяжёлые инфекционные заболевания: пневмония, скарлатина, фарингит, ревматизм, эндокардит, послеродовой сепсис.

Лечится стрептококк группы А антибиотиками: пенициллин, оксациллин, цефалоспорин, эритромицин. Они видоизменяются и к некоторым медикаментам проявляют устойчивость, поэтому врач подбирает лекарство индивидуально. Лечение антибактериальными средствами требуется не всегда. У некоторых людей иммунитет сам справляется с инфекцией. После перенесённого заболевания, у человека в организме вырабатывается типоспецифический иммунитет против этого возбудителя.

Для предотвращения попадания стрептококковой инфекции в организм следует делать профилактику:

• регулярно делайте влажную уборку и проветривайте чаще помещение;
• занимайтесь закаливанием;
• ведите здоровый образ жизни, откажитесь от вредных привычек;
• обрабатывайте чаще кожу антисептиками;
• питайтесь сбалансировано и правильно;
• в период эпидемии ОРЗ носите специальные маски, обрабатывайте посуду и все поверхности.

Если вы будете соблюдать все профилактические меры, тогда вы сможете избежать заражения гемолитическим стрептококком. Причиной заболевания может быть общение с больным или его вещи, которыми вы решили воспользоваться. Чаще в организм эти бактерии попадают через слизистую дыхательных путей.

Бактерии могут поселиться в несвежих продуктах, на просроченных молочных и мясных. На кожу инфекция проникает при помощи царапин, ссадин или при укусе насекомого. Беременная женщина может заразить своего не родившегося ребёнка.

Стрептококк в горле у ребёнка

Заразиться стрептококком в первую очередь подвержены люди со сниженным иммунитетом - беременные женщины, дети, люди преклонного возраста.

Симптомы:

Инкубационный период длится до четырёх дней. В начале заболевания ребёнок чувствует лёгкое недомогание и озноб, а потом все остальные симптомы. В раннем возрасте у ребёнка, после шести месяцев, когда в крови не циркулируют антитела матери, появляются такие симптомы:

• раздражительность и капризность;
• ребёнок отказывается от груди и любой пищи;
• повышается температура тела;
• из носа появляются выделения жёлтого или зелёного цвета;
• может возникнуть тошнота, рвота.

Ребёнок старшего возраста может рассказать о своих симптомах, которые его беспокоят. Как правило, они начинают больше спать, у них появляется вялость, теряется аппетит. На шее появляются лимфоузлы, болит горло и голова, возникают першение, сухость и покашливание.

Температура тела достигает 40°. В горле краснеют миндалины, появляются гнойники или гнойный налёт. Гнойные процессы развиваются и состояние может резко ухудшиться, нарастает общая интоксикация организма. При возникновении сыпи на теле при патологии, значит, что начинается скарлатина.

Стрептококковую инфекцию необходимо сразу начинать лечить, так как она начинает очень быстро прогрессировать. Если не лечить фарингит, то он быстро переродится в трахеит, а дальше развиваются осложнения гайморит, лимфаденит, отит. Через неделю может появиться пневмония. Чтобы подтвердить диагноз и назначить правильное лечение, необходимо будет сдать анализ мочи и крови ребёнка.

Представляет гетерогенную группу альфа-гемолитических стрептококков, является возбудителем инфекционного эндокардита.

Зеленящие стрептококки имеются в норме микрофлоры полости рта: на зубах и дёснах, некоторые вызывают кариес.

При небольших травмах слизистой рта (во время еды или чистки зубов) попадают в кровоток и прикрепляются к эндотелию. Обнаруживаются при синусите, абсцессе головного мозга печени.

Стрептококковая инфекция симптомы

Симптоматика разнообразна и зависит от места локализации патологического процесса.

Стрептококковая инфекция попадает в гортань на слизистые и начинает очень быстро развиваться. Она может проникнуть в ткань, которая окружает миндалины и произойдёт тонзиллит, а при проникновении в кровь вызовет сепсис . Попав в кровь, нарушается процесс терморегуляции, поражаются ткани организма. Страдает нервная система, печень, почки и кровеносные сосуды.

Инкубационный период длится до двух суток . Начинается заболевание с озноба, у человека пропадает аппетит, появляется слабость. По всей голове проходит тупая головная боль, ломит поясницу и все суставы. В начале развития заболевания боль в горле практически не беспокоит, максимальная выраженность появляется на вторые сутки. При ангине сыпь на коже не проявляется. Бело-жёлтый налёт образуется на миндалинах и имеет гнойный характер или появляются фолликулы, белые пузыри.

Рожа

На коже размножаются стрептококки, симптомы как у инфекционных заболеваний: температура тела повышается до 40°, человека знобит и появляется слабость, беспокоят мышечные боли.

Кожный покров воспаляется на инфицированном участке, приобретает яркую окраску и чёткие границы. Если степень тяжести заболевания невысока, то кожа может просто иметь лёгкое покраснение или кровоизлияния и пузыри.

Возникает редко и распространяется по всей костной системе.

Проявляется гнойным поражением костного мозга. Впоследствии костное вещество отмирает, на его месте образуется гнойник, который потом прорывается наружу.

Сепсис

Такая болезнь настигает людей с очень низким иммунитетом. Развивается процесс из первичного очага и проходит по организму с потоком крови. Стрептококки проникают во все органы и суставы и образуют гнойники. Стрептококковая инфекция может развиваться годами или даёт реакцию сразу и тогда больного до трёх дней от заражения ждёт летальный исход.

Диагностика

Чтобы выявить наличие стрептококка необходимо сдать анализы крови и мочи . Для определения вида возбудителя, следует провести бактериологическое исследование (мазок с кожи, миндалин и мокрота). Дополнительно могут взять мазок из влагалища и слизь с уретры. Симптомы больного и анализы помогут врачу поставить правильный диагноз и назначить соответствующее лечение.

Стрептококковая инфекция лечение

Лечение проводится с помощью антибиотиков , обычно назначают из пенициллинового ряда. Если больной имеет аллергию на этот вид, то его заменяют на эритромицины. После лечения антибиотиками назначаются препараты для нормализации микрофлоры кишечника (Линекс или Бактисубтил). Они вытесняют из организма токсины и повышают иммунитет. Лечение проводится комплексно при соблюдении профилактических мер:

1. Три литра любой жидкости выпивать за сутки, для избавления организма от токсинов и ускорения лечения.
2. Принимать витамин С, который укрепляет стенки сосудов и выводит токсины.
3. Иногда принимать препараты с содержанием парацетамола для снижения симптоматики болезни.

В качестве профилактики при ангине делайте полоскание горла. В рацион следует включать только легкоусвояемую пищу, так как у организма просто не хватит сил на её расщепление. Обогатите диету продуктами, содержащими витамины и минералы.

Стрептококк – что это такое и чем опасно для организма человека? Это особый вид бактерии, которые обитает в организме животного и человека. Основными зонами поражения являются кожные покровы, дыхательная система и кишечник.

Проникновение бактерий в организм приводит к развитию сильной головной боли, повышению температуры тела, ломоте, общей слабости, нарушениях со стороны пищеварительной системы. При отсутствии лечебного воздействия не исключено развитие тяжелых осложнений.

Стрептококк – микроорганизм, который обитает на теле животного и в организме человека. Проникая в органы и системы, он проводит к нарушению их функциональности. Разновидностей данной множество, при этом не все они опасны.

Однако, выделяют и опасные стрептококки, которые приводят к развитию различных заболеваний. На них возлагается этиологическая роль в появлении многих болезней, в частности ревматизма.

Стрептококк

Главными источниками заражения являются больные люди и носители, которые не испытывают никаких симптомов.

Основные пути передачи бактерии: воздушно-капельный и контактно-бытовой. Человек способен заразиться через немытые руки, грязную посуду и предметы, которыми пользуется больной человек.

Палочка стрептококка проникает в организм через дыхательную систему. В редких случаях это происходит через повреждения целостности кожных покровов. После сбора в одном месте, бактерии начинают активно выделять ферментные вещества, которые позволяют им проникать дальше в кровеносную систему.

В процессе своей жизнедеятельности микроорганизмы производят токсины, отравляющие организм. В результате чего человека донимают симптомы интоксикации.

Заражение способно произойти и путем аутоинфицирования. Этот процесс включает в себя неудачное выдавливание гнойников, наличие гнойных поражений в ротовой полости и неправильное удаление миндалин. Это приводит к проникновению инфекции в организм.

Бактерии стрептококки способны вызвать системные заболевания. Этот процесс связан не с путем заражения, а ответной реакцией организма. Такое явление встречается при аллергизации организма. В этом случае, микроорганизмы, призванные бороться со стрептококками начинают атаковать собственные органы и системы.

Какие бывают типы бактерий

На сегодняшний день фиксируется разновидностей стрептококковой инфекции. Патогенными и наиболее распространенными являются:

• гамма-стрептококк (негемолитический);
• бета-гемолитический стрептококк (группы А-U).

Альфа-гемолитический стрептококк

Альфа-гемолитический стрептококк часто называют зеленящим, обусловлено это способностью бактерии окрашивать кровяную среду в зеленый цвет. Они являются наименее вредными . Микроорганизмы альфа и гамма типа вызывают поражение горла.

Бета-гемолитический стрептококк

Бактерии передаются воздушно-капельный и контактно-бытовой путем

Самую обширную группу представляют бета-гемолитические бактерии. Они подразделяются на три подгруппы: А, В, С, D, F и Н. Инфекция относящаяся к группе А является возбудителем широкого диапазона действия. Бактерии данного типа бывают неивазивными или инвазивными .

Первая разновидность отличается широкой распространенностью, однако, по своему воздействию они не настолько серьезные. Часто встречаются инфекции поражающие носоглотку.

Микроорганизмы инвазивного типа не так распространены, однако их протекание считается самым тяжелым . Они способны инфицировать многие органы и системы. Обнаружить патогенные элементы можно в крови.

Группа В

Группа В опасна для стариков и новорожденных детей. При проникновении в организм, бактерии способны привести к развитию тяжелых воспалительных процессов. Под воздействием определенных факторов, они могут колонизироваться в кишечнике и женской репродуктивной системе.

Это несет серьезную опасность для беременности. Фото стрептококков показывают, как на самом деле выглядят патогенные микроорганизмы.

Стрептококк фото

Группа С

Группа С оказывает негативное воздействие на животных . У лошадей данный тип бактерии приводит к удушью. Проникновение патологии в организм вызывает тяжелые заболевания у многих млекопитающих, в частности крупного рогатого скота и лошадей.

Группа D

Группа D – это энтерококки, которые не наносят особого вреда организму . Они способны привести к развитию заболеваний только в самых редких случаях.

Группа F

Группа F была выявлена относительно недавно. Бактерии распространены среди животных , однако у человека они также способны привести к развитию серьезных заболеваний.

Группа Н

Группа Н распространена среди домашних питомцев, в частности — собак средних размеров . Развитие болезни у человека возможно только в том случае, если он вступает в контакт с ротовой полостью питомца.

Собака способна лизнуть хозяина, это и является потенциальным риском появления инфекции в организме человека. Эти случаи редкие, но зафиксированные.

Болезни развивающиеся под воздействием стрептококка

Стрептококк — что это, и какие заболевания вызывает? Бактерии негемолитического типа для человека не несут опасности . Основными провокаторами серьезных болезней выступают гемолитические разновидности.

Альфа-гемолитические стрептококки считаются провокаторами инфекционного эндокардита, гнойного периодонтита и абсцессов внутренних органов. Они играют немаловажную роль в процессе зарождения кариеса.

Бета-гемолитические бактерии приводят к появлению скарлатины, ангины, сепсиса и рожи. Фото стрептококка на коже показывает зоны повреждения и степень внедрения.

Стрептококк на коже

Инфекции группы В несут опасность для новорожденного ребенка. При проникновении в организм она приводит к развитию гнойничковых болезней, в частности менингита и сепсиса. Попадают бактерии внутриутробно или во время родового процесса. Примечательно, что у мамы могут полностью отсутствовать любые проявления стрептококка.

Основные заболевания, вызываемые бактерией:

• ангина;
• фарингит;
• скарлатина;
• пародонтит;
• отит;
• рожа;
• стрептодермия;
• бронхит;
• воспаление легких;
• лимфаденит;
• менингит;
• кариес;
• сепсис.

проявляется воспалением и образованием красных пятен , которые возвышаются над здоровыми кожными покровами. Это специфический симптом, дополняющийся головной болью, общим недомоганием и повышением температуры тела.

Стрептококковая инфекция на коже

Наиболее распространенными кожными заболеваниями являются рожистое воспаление и стрептодермия. Рожа проявляется слабостью, мышечной болью и высокой температурой тела. На кожных покровах фиксируются воспаленные участки, нередко покрытые пузырьками.

Стрептодермия – это болезнь стрептококка, которая провоцирует загрязнение кожных покровов и снижение иммунитета. Часто развивается на открытых участках кожи, в уголках рта и ушных раковинах. Язвочки самостоятельно исчезают спустя несколько суток.

Выделяют определенные классы, которые поражают дыхательные пути, кишечник и кожные покровы. Каждая разновидность стрептококка отличается своим специфическим течением.

Вконтакте

Содержание статьи

Стрептококки

Обнаружены Т. Бильротом в 1874 г. при рожистом воспалении и через несколько лет Л. Пастером при гнойных заболеваниях и сепсисе. Род Streptococcus включает многочисленные виды, которые различаются между собой по экологическим, физиологическим и биохимическим признакам, а также патогенности для человека.

Морфология, физиология

Клетки шаровидной или овальной формы, расположенные попарно или в виде цепочек разной длины. Грамположительны. Хемоорганотрофы. Требовательны к питательному субстрату. Размножаются на кровяных или сахарных средах. На поверхности твердых сред образуют мелкие колонии, на жидких дают придонный рост, оставляя среду прозрачной. По характеру роста на кровяном агаре различают а-гемолитические стрептококки, окруженные небольшой зоной гемолиза с зеленовато-сероватым оттенком, Р-гемолитические, окруженные прозрачной зоной гемолиза, и негемолитические, не изменяющие кровяной агар. Однако гемолитический признак оказался весьма вариабельным, вследствие чего для дифференциально-диагностических целей используется с осторожностью. Ферментация углеводов не является стабильным и четким признаком, вследствие чего он не используется для дифференцировки и идентификации стрептококков. Стрептококки аэробы, не образуют каталазы, в отличие от стафилококков.

Антигены

Стрептококки имеют несколько типов антигенов, позволяющих дифференцировать их друг от друга. По Р. Лэндсфилд (1933 г), их подразделяют на 17 серогрупп по полисахаридным антигенам, которые обозначаются заглавными латинскими буквами А, В, С, D, E, F и т.д. К самой многочисленной серогруппе А относится вид S.pyogenes. Дифференциация на серотипы проводится по белковому М-антигену. Сейчас насчитывается свыше 100 серотипов стрептококков серовара А.У некоторых стрептококков этой серогруппы обнаружены перекрестнореагирующие антигены (ПРА). Антитела к ним реагируют с мышечными волокнами миокарда, тканью почки и других органов человека. ПРА могут стать причиной иммунопатологических состояний.

Экология и эпидемиология

Стрептококки сравнительно широко распространены в природе. По экологическому признаку их можно подразделить на несколько групп. К первой группе относят стрептококки серогруппы А, патогенные только для человека (S. pyogenes). Вторую группу составляют патогенные и условно-патогенные стрептококки серогруппы В и D (S. agalactia, S. faccalis и др.), патогенные для людей и животных. Третья экологическая группа - это условно-патогенные оральные стрептококки (S. mutans, S. mitis и др.). Таким образом, одни стрептококки вызывают только антропонозные инфекции, другие - антропозоонозные инфекции.В организме человека стрептококки обитают в экологических нишах: полость рта, верхние дыхательные пути, кожа и кишечник. Источником инфекции являются здоровые бактерионосители, рековалесценты и больные люди. Основной путь распространения возбудителя - воздушно-капельный, реже контактный.Во внешней среде стрептококки сохраняются в течение нескольких дней. При нагревании до 50°С они погибают через 10-30 мин.

Стрептококковые инфекции

Семья Streptococcaceae объединяет в своем составе семь родов: Streptococcus; Enterococcus, Aerococcus, Pediococcus, Peptostreptococcus, Lactococcus, Leuconostoc. Cреди них в инфекционной патологии человека наибольшее значение имеют стрептококки и энтерококки. Общепризнанной является классификация стрептококков с Ленсфильд. На основе специфических полисахаридов и поверхностных белковых антигенов выделяют 20 серологических групп, которые обозначаются заглавными буквами латинского алфавита от А до V. Патогенные виды относятся к серогруппы А, В, С и D, реже - к группам F и J. их определяют с помощью реакции преципитации с соответствующими антисыворотки. Однако, из-за отсутствия преципитирующих сывороток бактериологические лаборатории не имеют возможности проводить серологическую идентификацию стрептококков. Поэтому в современных условиях используют другие критерии их дифференциации.Основой лабораторной диагностики заболеваний, вызванных стрептококками, является бактериологические и серологические методы.

Взятие материала для исследования

При сепсисе, остеомиелите и других видах генерализованной стрептококковой инфекции берут кровь. При других забирают гной, выделения слизистых оболочек, мокрота, ликвор, желчь, мочу, стул и т.д., в зависимости от локализации патологического процесса. Правила взятия и доставки материала в лабораторию такие же, что и при стафилококковых инфекциях.

Первичная микроскопия

Первичная микроскопия мазков из навоза, раневого содержимого, секрета слизистой и т.д. (кроме крови) проводится после окраски их по Граму. Стрептококки имеют фиолетовый цвет, выглядят короткими цепочками, диплококками или в одиночку.Часто по характеру расположения клеток в мазке трудно или вообще невозможно определить принадлежность бактерий к стрептококков. Поэтому необходимо выделять чистую культуру и устанавливать вид возбудителя.

Бактериологическое исследование

Для установления диагноза при острых стрептококковых инфекциях (за исключением скарлатины с типичной клинической картиной) нужно проводить бактериологическое исследование. При подозрении на сепсис сеют у постели больного 10-15 мл крови во флакон, содержащий 100-150 мл сахарного бульона (соотношение крови и среды 1:10). Лучшие и надежные результаты дают посевы крови в среду Китт-Тароцци с полужидким агаром. В нем будут расти и анаэробныестрептококки. Посевы крови инкубируют в термостате при 37 ° С. При росте стрептококков на дне среды появляется осадок. В среде Китт-Тароцци может образовываться и газ. В мазках из осадка обнаруживают грамположительные стрептококки в виде длинных цепочек. Пневмококки располагаются короткими цепочками или парно в виде ланцетовидными клеток, возвращенных друг друга утолщенными концами. Для энтерококков свойственно парное расположение, реже тетрадами или кучками, но гроздьями. Отдельные клетки энтерококков полиморфные (большие и малые).При отсутствии роста посевы выдерживают в термостате в течение 3-4 недель, периодически проводя бактериоскопию.Культуру, выросшую после бактериоскопии пересевают в чашку с кровяным агаром для определения типа гемолиза. Через 18-20 ч вырастают типичные колонии, окруженные светлой зоной (бета-гемолиз) или зоной позеленения (альфа-гемолиз). Хотя способность к гемолизу не имеет абсолютного диагностического значения, все же при исследовании стрептококков, выделенных от человека, нельзя исключать Негемолитические колонии гамма-стрептококков. За очень редким исключением они не связаны с инфекционными заболеваниями.Чтобы лучше и точнее идентифицировать выделенные гемокультуры стрептококков колонии с кровяного агара рекомендуют отсеивать на простой МПА, молоко с метиленовым синим, желчный бульон (или желчно-кровяной агар). Гемолитические стрептококки серогруппы А не растут на простых и желчных средах, не обесцвечивают метиленовый синий в молоке. Энтерококки хорошо растут на агаре с желчью. Далее различные виды стрептококков можно дифференцировать по биохимическим свойствам. Но биохимические признаки стрептококков не являются постоянными, что в некоторой степени обесценивает использование этих тестов.Навоз, раневой содержание, слизь из зева и носа, собранные ватными тампонами, а также мокроты, ликвор, мочу и т.д. сеют на кровяной агар. Материал наносят на среду в небольшом количестве, а затем петлей или шпателем рассеивают его легкими штрихами по всей поверхности. Не рекомендуется втирать изучаемый материал в агар.Для повышения частоты посева стрептококков тампоны после посева на кровяной агар еще у постели больного погружают в пробирку со средой Китти-Тароцци, к которому добавляют полужидкий агар и 2-3 капли дефибринированной крови кролика. Посев инкубируют 3-4 ч при 37 ° С, а затем высевают на чашки с кровяным агаром, выделяют и идентифицируют по обычной схеме.Для быстрой идентификации бета-гемолитических стрептококков серогруппы А используют экспресс-метод с помощью реакции иммунофлюоресценции. Для этого мазок из выделенной культуры фиксируют в 95% спирте в течение 15 мин, окрашивают соответствующими люминесцуючимы сыворотками и рассматривают под люминесцентным микроскопом. Практически все гемолитические стрептококки группы А чувствительны к бацитрацину и дают положительный ПИР-тест, есть гидролизует пирролидонил-бетанафтиламид. Еще быстрее стрептококки этой группы определяют в мазках из рото-и носоглотки, обрабатывая их современными коммерческими тест-наборами. Групповые А-антигены стрептококков экстрагируют с помощью ферментов или других химических реагентов и определяют их в реакциях латекс-агглютинации, коаглютинации или иммуноферментным анализом.Стрептококки группы В, как правило, нечувствительны к действию бацитрацину, раскладывают гиппурат и дают положительный КАМП-тест (усиление гемолиза под влиянием дисков, содержащих стафилококковый бета-гемолизин).Дальнейшую идентификацию проводят серогипуванням в реакциях латекс-агглютинации или коаглютинации с коммерческими реагентами или мечеными моноклональными антителами. Стрептококки в мазках из влагалища можно быстро идентифицировать с помощью таких же тест-систем, как для стрептококков группы А.Для определения вирулентности выделенных культур стрептококков используют биопробу на белых мышах или устанавливают концентрацию поверхностного М-протеина, характерного только для патогенных штаммов. Для этого получают солянокислый экстракты из молодых культур стрептококков и определяют в них содержание М-антигена.При определении альфа-и бета-гемолитических стрептококков в воздухе операционных, родильных залов, комнат для новорожденных, манипуляционных и других больничных помещений делают посевы воздуха седиментационным методом или с помощью аппарата Кротова на среду Гарро (до растопленного МПА добавляют 5% дефибринированной крови и 0, 2% водного 0,1% раствора ганцианвиолету). Энтерококки и сапрофитная микрофлора на этой среде не растут.

Серологическое исследование

При хронических стрептококковых инфекциях выделить возбудителя, как правило, не удается, особенно при длительном лечении больных антибиотиками и другими противомикробными препаратами. В таком случае проводят серологические исследования: определение стрептококкового антигена в сыворотке крови и моче, титрования антител к О-стрептолизин, гиалуронидазы и ДНК-азы.Антиген стрептококков определяют в РСК. Необходимые для этого антистрептококови сыворотки получают путем гиперимунизации кроликов убитой культурой бета-гемолитических стрептококков серогруппы А. Титром антигена считают то наибольшее разведение сыворотки, которое задерживает гемолиз. Лучшие результаты получают при постановке РСК на холоде. В последнее время для выявления стрептококковых антигенов в сыворотке крови довольно успешно используют метод ИФА.При определении стрептококковых антигенов в моче больных используют реакцию преципитации. Осадок утренней порции мочи после центрифугирования обрабатывают противострептококковых Преципитирующие сывороткой. Результат учитывают через час при комнатной температуре. Стрептококковые антигены в сыворотке крови и моче часто обнаруживают при скарлатине, ангине, ревматизме.Определение антител против О-стрептолизин (антистрептолизина-О) проводят внесением рабочей дозы стандартного препарата О-стрептолизин в ряд пробирок с кратными разведениями сывороток (1:25, 1:50, 1:100 и т.д.). Смесь инкубируют в термостате в течение 15 мин, затем во все пробирки вносят по 0,2 мл 5% взвеси эритроцитов кролика и снова помещают в термостат на 60 мин. При наличии антистрептолизина в крови больных гемолиза не наступает. Пробирка с наибольшим разведением сыворотки, в которой есть выраженная задержка гемолиза, содержит 0,5 AO (антитоксических здиниць) антистрептолизина-О.Для определения антител против гиалуронидазы (антигиалуронидазы) в сыворотке больных в разных разведениях вносят стандартную дозу гиалуронидазы и рабочую дозу гиалуроновой кислоты, которую готовят из пупочных канатиков новорожденных. При наличии антигиалуронидазы в пробирках образуется сгусток после добавления уксусной кислоты. Пробирка с наименьшим количеством сыворотки, в которой есть сгусток, содержащий 1 AO (антитоксическое единицу) антигиалуронидазы. При ревматизме и стрептококковом гломерулонефрите в сыворотке крови обнаруживают> 500 AO антистрептолизина и> 800-1000 AO антистрептогиалуронидазы уже с первых дней болезни. Именно при этих заболеваниях чаще всего проводят обе серологические реакции. Во многих странах используют коммерческие тест-системы для определения антител ло стрептолизин, гиалуронидазы, стрептокиназы, ДНК-азы и других экзоферментов стрептококков.

Похожие статьи